ETD

• epatocarcinoma (HCC)
• epithelial-mesenchymal transition
• KDM2A
• Notch3
• staminalità. hepatocellular carcinoma
• stemness.
• transizione epitelio-mesenchimale (EMT)

Il carcinoma epatocellulare (HCC) è la terza causa di morte per cancro nel mondo e circa il 40% dei pazienti non risponde alle terapie disponibili. È quindi essenziale comprenderne i meccanismi molecolari di insorgenza e progressione. Tra i pathway coinvolti, un ruolo rilevante è svolto dalla famiglia Notch. Notch3, sovraespresso nell’HCC, è associato a metastasi e ridotta sopravvivenza e in altri tumori, i suoi livelli abnormi sono correlati ad alterazioni epigenetiche mediate da demetilasi istoniche. Dati preliminari indicano che KDM2A è sovraespressa nell’HCC e aumenta con il grading. L’obiettivo dello studio è stato valutare una possibile relazione tra KDM2A e Notch3 e analizzarne l’impatto su staminalità e transizione epitelio-mesenchima (EMT).Gli esperimenti sono stati condotti sulla linea Huh7, sia wild-type che silenziata in modo transiente per Notch3 o KDM2A mediante siRNA specifici. Il knockdown (KD) di KDM2A ha determinato una significativa riduzione dell’mRNA e della proteina Notch3 (p<O.OOO1 e p<O.O1). Inoltre, nelle cellule KDM2A-KD si osservava una diminuzione dei marker di staminalità CD44, CD133 ed EpCAM (p<O.O5, p<O.OO1 e p<O.OOO1), analoga a quella rilevata nelle cellule Notch3-KD (p<O.OOO1 per tutti i marcatori). Il KD di Notch3 modificava anche l’espressione di numerosi geni legati all’EMT, tra cui Vimentina (p<O.OO1), β-catenina (p<O.O5), E-caderina (p<O.O5), Slug (p<O.O5), Zeb1 (p<O.O5), Snail1 (p<O.O1), Twist (p<O.OOO1) e MMP9 (p<O.OO1). Nel complesso, questi risultati supportano l’esistenza di un asse funzionale KDM2A–Notch3 nell’HCC, in cui KDM2A contribuirebbe a sostenere l’espressione e l’attività biologica di Notch3.

Hepatocellular carcinoma (HCC) is the third leading cause of cancer death worldwide, and approximately 40% of patients do not respond to available therapies. Understanding the molecular mechanisms of its onset and progression is therefore essential. Among the pathways involved, the Notch family plays a significant role. Notch3, overexpressed in HCC, is associated with metastasis and reduced survival, and in other tumors, its abnormal levels are correlated with epigenetic alterations mediated by histone demethylases. Preliminary data indicate that KDM2A is overexpressed in HCC and increases with grading.
The aim of the study was to evaluate a possible relationship between KDM2A and Notch3 and analyze its impact on stemness and epithelial-mesenchymal transition (EMT). The experiments were conducted on the Huh7 cell line, both wild-type and transiently silenced for Notch3 or KDM2A using specific siRNAs. Knockdown (KD) of KDM2A resulted in a significant reduction in Notch3 mRNA and protein (p<O.OOO1 and p<O.O1). Furthermore, a decrease in the stemness markers CD44, CD133, and EpCAM was observed in KDM2A-KD cells (p<O.O5, p<O.OO1, and p<O.OOO1), similar to that detected in Notch3-KD cells (p<O.OOO1 for all markers). Notch3 KD also altered the expression of several EMT-related genes, including Vimentin (p<O.OO1), β-catenin (p<O.O5), E-cadherin (p<O.O5), Slug (p<O.O5), Zeb1 (p<O.O5), Snail1 (p<O.O1), Twist (p<O.OOO1), and MMP9 (p<O.OO1). Overall, these results support the existence of a functional KDM2A–Notch3 axis in HCC, in which KDM2A contributes to sustaining the expression and biological activity of Notch3.