• glutatione
• metodo spettrofotometrico

Il glutatione è il principale tiolo a basso peso molecolare presente in tutti i tessuti dei mammiferi, negli animali ed in molte piante. La molecola può esistere sia nella forma ridotta GSH che ossidata GSSG, la quale si forma per ossidazione, enzimatica o spontanea, di due molecole di GSH che si uniscono attraverso un ponte disolfuro. La concentrazione di GSH intracellulare è dell’ordine dei mM, mentre il GSSG si ritrova con una concentrazione di due ordini inferiore. Il giusto rapporto tra GSH-GSSG, mantenuto costante dall’enzima glutatione reduttasi, consente di mantenere il corretto stato redox cellulare e previene il danno ossidativo.
Dal punto di vista strutturale, il GSH (γ-L-glutamil-L-cisteinglicina) è un tripeptide costituito dagli amminoacidi acido glutammico, glicina e cisteina e si caratterizza dal particolare legame gamma-glutammico, in sostituzione del normale legame peptidico, tra i residui di acido glutammico e cisteina. La presenza del gruppo sulfidrilico della cisteina conferisce al GSH proprietà antiossidanti che gli permettono di interagire con specie reattive dell’ossigeno o con altre sostanze elettrofile. Ne deriva un importante ruolo fisiologico nella detossificazione dei farmaci, delle molecole xenobiotiche e dei loro metaboliti.
Diversi studi hanno riportato un coinvolgimento del GSH nella modulazione di processi cellulari come l’apoptosi (morte cellulare programmata), nella sintesi di DNA e proteine e nel trasporto degli amminoacidi.
È stato inoltre dimostrato che il peptide gioca un ruolo importante nella prevenzione di alcune malattie cardio-vascolari, di tumori, di disfunzioni del sistema immunitario.
Numerose sono le tecniche adottate per quantificare il GSH, il GSGG e il loro rapporto allo scopo di valutare lo stato redox cellulare. Alcune, ad esempio, si basano su analisi spettrofotometriche o spettrofluorimetriche, altre su una separazione tramite elettroforesi capillare o HPLC (High-performance liquid chromatographic). Questi metodi, seppur validi, richiedono analisi lunghe e l’utilizzo di strumenti costosi.
Lo scopo del mio studio è stato quello di mettere a punto un nuovo semplice metodo spettrofotometrico di dosaggio della concentrazione di glutatione in campioni biologici.