Tipo di tesi
Tesi di laurea magistrale
Titolo
Valutazione dell’attività citotossica e dell’impatto metabolico di profarmaci NAD-like in cellule MIA PaCa-2
Corso di studi
BIOLOGIA APPLICATA ALLA BIOMEDICINA
Parole chiave
- mia paca-2
- nad-Like
- profarmaci
Data inizio appello
08/06/2026
Consultabilità
Non consultabile
Data di rilascio
08/06/2096
Riassunto (Italiano)
Il carcinoma duttale pancreatico (PDAC) rappresenta una delle neoplasie più aggressive e con la prognosi peggiore, caratterizzata da elevata resistenza ai trattamenti convenzionali e da una marcata capacità di adattamento metabolico. Negli ultimi anni, il metabolismo tumorale e in particolare i pathway NAD⁺- dipendenti hanno suscitato crescente interesse come potenziali bersagli terapeutici, poiché strettamente coinvolti nei processi di produzione energetica, omeostasi redox, sintesi nucleotidica e proliferazione cellulare.
Lo scopo del presente lavoro è stato la caratterizzazione funzionale su cellule Mia PaCa2 di una libreria di composti NAD-like, progettati come pro-farmaci strutturalmente correlati al cofattore NAD⁺, con l’obiettivo di valutarne il potenziale biologico e chiarirne i possibili meccanismi d’azione in un contesto tumorale.
In particolare, l’interesse principale dello studio non è stato limitato alla valutazione dell’effetto citotossico a livello cellulare, ma è stato ampliato con l’analisi delle proprietà funzionali dei composti, con l’intento di comprendere se e come, tali molecole siano in grado di interferire con pathway metabolici fondamentali, in particolare quelli redox NAD⁺-dipendenti e del metabolismo delle purine. A tal fine, è stata condotta una valutazione sistematica di 30 derivati NAD-like, caratterizzati da differenze strutturali ma accomunati dalla presenza di elementi riconducibili al nucleo redox del NAD. Lo screening iniziale ha permesso di selezionare i composti più attivi sulla base dei valori di EC50, identificando molecole candidate per successive analisi funzionali approfondite.
Successivamente, lo studio è stato esteso all’analisi degli effetti metabolici dei composti, con particolare attenzione alla possibile modulazione del metabolismo glicolitico e del flusso del lattato, nonché alla valutazione dell’attività della lattato-deidrogenasi A (LDHA), al fine di verificare l’eventuale presenza di un’inibizione enzimatica diretta.
Parallelamente, mediante elettroforesi capillare, è stato analizzato l’impatto dei composti sul bilancio nucleotidico intracellulare e sulla quantità totale di NAD, con l’obiettivo di valutare un possibile coinvolgimento della via delle purine e dell’enzima IMPDH come bersaglio funzionale.
Infine, l’analisi proteomica ha permesso di ampliare la visione d’insieme sugli effetti indotti dai composti, identificando pathway cellulari alterati e potenziali meccanismi compensatori attivati in risposta al trattamento.
L’obiettivo finale è quindi distinguere tra semplici analoghi strutturali del NAD⁺ privi di un reale impatto funzionale sulle cellule Mia-PaCa2 e molecole in grado di modulare in maniera significativa i processi metabolici tumorali, integrando le evidenze funzionali, metaboliche e proteomiche per costruire una lettura coerente del loro meccanismo d’azione.
Nel complesso, il lavoro contribuisce alla selezione preliminare delle molecole analizzate, fornendo informazioni utili alla definizione del loro profilo biologico nel carcinoma pancreatico.
