• crispr/cas9
• nsd1
• sotos
• zebrafish

I disturbi dello spettro autistico (ASD) sono un gruppo eterogeneo di disordini del neuro-sviluppo, ad insorgenza precoce e pervasiva, clinicamente caratterizzati da grave compromissione delle aree di sviluppo cognitivo, sociale e comunicativo. Tra i geni candidati quale causa-ASD, il gene NSD1 codifica per una proteina ad attività N-metiltransferasica deputata principalmente alla modifica epigenetica di metilazione H3K36. Nell’uomo, alterazioni del gene sono rilevate in varie forme di neoplasie, disabilità intellettive e in pazienti affetti dalla Sindrome di Sotos, un disordine ereditario a trasmissione autosomica dominante caratterizzato da iper-accrescimento prenatale e infantile, specifico dismorfismo facciale, macrocefalia. Per caratterizzare l’effetto della perdita di funzione di NSD1, con riferimento allo sviluppo neuronale, è stato utilizzato il teleosteo Danio rerio (Zebrafish), in cui distinguiamo gli ortologhi nsd1a e nsd1b. Il progetto sperimentale è volto a creare e caratterizzare un modello con perdita di funzione per i geni nsd1 mediante tecnica di gene editing CRISPR/Cas9. Per causare un knock-out del gene nsd1a, è stata indotta una mutagenesi mirata attraverso la microiniezione nello zigote di Zebrafish del complesso ribonucleoproteico (RNA-guida e Cas9). Analisi molecolari e morfologiche sono state condotte fino allo stadio larvale della generazione F2. In parallelo, sono stati condotti esperimenti per valutare i livelli di espressione dei trascritti nsd1 durante lo sviluppo embrionale di zebrafish.