ETD

• native breeds
• pollo
• poultry
• probiotic
• probiotico
• razze autoctone
• salmonellosi
• salmonellosis

Oggi l’utilizzo di probiotici nella filiera avicola sembra promettente in quanto stimola l’attivazione delle cellule immunitarie e aumenta la resistenza alle infezioni. Inoltre, contribuisce a contrastare importanti patogeni come Salmonella enterica, responsabile della salmonellosi, una zoonosi frequentemente riscontrata nell’uomo a causa del consumo di prodotti contaminati derivanti dalla filiera avicola. Pertanto, in questo progetto è stato testato il potenziale di probioticità di 9 ceppi di lattobacilli appartenenti a 4 specie distinte (L. kitasatonis, L. agilis, L. salivarius e L. reuteri) al fine di valutare un loro successivo impiego come probiotici nella filiera avicola. Lo svolgimento di questo progetto ha previsto l’utilizzo di ceppi di lattobacilli derivanti da tamponi cloacali di polli di razze autoctone italiane precedentemente ottenuti e identificati.
La prima valutazione che è stata eseguita è stata quella della resistenza all’esposizione a valori di pH acido (1,5, 2 e 6,8 come controllo) per diversi tempi (60’, 90’ e 120’). I ceppi maggiormente resistenti sono stati VAL FI 44 (L. reuteri), LI PI 3 (L. salivarius) e VAL FI 55 (L. kitasatonis).
È stata poi valutata la resistenza ad esposizione alle percentuali di sali biliari dello 0,3% e dell’1% per 24 h, sempre in presenza di un controllo positivo (terreno privo di sali). I ceppi risultati maggiormente resistenti sono stati BS FI 11 (L. agilis), VAL FI 55 (L. kitasatonis), PP 57 e LIPI 3 (L. salivarius).
Dopodiché, per verificare l’eventuale presenza nel genoma dei ceppi di LAB dei geni msa e bsh coinvolti nell’abilità ad aderire alle cellule intestinali e nella degradazione dei sali biliari, i ceppi sono stati testati mediante PCR, ma nessuno ha mostrato la presenza dei due geni ricercati.
Infine, la valutazione dell’attività anti-Salmonella dei 9 isolati è stata svolta mediante l’utilizzo dell’Agar Slab Method e del Well Diffusion Method. I due test hanno mostrato risultati concordi, dimostrando che gli isolati in grado di formare i maggiori aloni di inibizione sono stati LI PI 3, MU FI 9, AN 03 e PP 57 (L. salivarius) e BS FI 11 (L. agilis); l’unico ceppo per cui sono stati osservati risultati contrastanti è stato VAL FI 55 (L. kitasatonis) che ha mostrato il maggior alone di inibizione rispetto a tutti gli altri LAB nella valutazione svolta mediante l’utilizzo dell’Agar Slab Method e un alone invece nullo mediante l’utilizzo del Well Diffusion Method.
Prendendo in considerazione tutti i risultati ottenuti dai diversi test, è stato possibile affermare che i ceppi potenzialmente migliori per il loro utilizzo come probiotici nella filiera avicola sono stati LI PI 3 (L. salivarius) e VAL FI 55 (L. kitasatonis).

Today, the use of probiotics in the poultry industry appears promising as it stimulates the activation of immune cells and increases resistance to infections. It also helps to combat important pathogens such as Salmonella enterica, responsible for salmonellosis, a zoonosis frequently found in humans due to the consumption of contaminated products derived from the poultry industry. Therefore, this project tested the probiotic potential of nine strains of lactobacilli belonging to four distinct species (L. kitasatonis, L. agilis, L. salivarius, and L. reuteri) to evaluate their subsequent use as probiotics in the poultry industry. This project involved the use of lactobacillus strains derived from cloacal swabs of native Italian chicken breeds previously obtained and identified.
The first assessment carried out was resistance to exposure to acidic pH values (1.5, 2, and 6.8 as a control) for different periods of time (60, 90, and 120 minutes). The most resistant strains were VAL FI 44 (L. reuteri), LI PI 3 (L. salivarius), and VAL FI 55 (L. kitasatonis).
Resistance to exposure to bile salt concentrations of 0.3% and 1% for 24 hours was then assessed, again in the presence of a positive control (medium without salts). The most resistant strains were BS FI 11 (L. agilis), VAL FI 55 (L. kitasatonis), PP 57, and LI PI 3 (L. salivarius).
Subsequently, to verify the possible presence in the genome of LAB strains of the msa and bsh genes involved in the ability to adhere to intestinal cells and in the degradation of bile salts, the strains were tested using PCR, but none showed the presence of the target genes.
Finally, the anti-Salmonella activity of the 9 isolates was evaluated using the Agar Slab Method and the Well Diffusion Method. The two tests showed consistent results, demonstrating that the isolates capable of forming the largest inhibition halos were LI PI 3, MU FI 9, AN 03, and PP 57 (L. salivarius) and BS FI 11 (L. agilis). The only strain for which conflicting results were observed was VAL FI 55 (L. kitasatonis), which showed the largest inhibition zone compared to all other LABs by the Agar Slab Method and no inhibition zone by the Well Diffusion Method.
After observing all the results obtained from the various tests, it was possible to conclude that the strains potentially best suited for use as probiotics in the poultry industry were LI PI 3 (L. salivarius) and VAL FI 55 (L. kitasatonis).