ETD

• analizzatore CASA
• camera di conteggio
• CASA analyzer
• concentration
• concentrazione
• counting chamber
• motilità
• motility
• seme
• semen
• stallion
• stallone

La valutazione della qualità seminale costituisce il cardine per la stima del potenziale di fertilità dello stallone e si basa sull’analisi di parametri macroscopici e microscopici, tra cui motilità, concentrazione e morfologia spermatica. L’impiego di sistemi CASA (Computer-Assisted Semen Analysis) ha migliorato la standardizzazione delle valutazioni, sebbene i risultati ottenuti possano essere influenzati dal software utilizzato, dalla camera di conteggio e dalle condizioni operative. Il presente studio ha avuto come obiettivo il confronto tra due sistemi CASA, AndroVision® (Minitube) e Ceros II® (Hamilton Thorne), associati a due differenti camere di conteggio, Leja® (IMV Technologies) e SpermVU® (Spermtech), nella valutazione della motilità, della concentrazione e dei parametri cinematici del seme equino congelato-scongelato. L’analisi è stata condotta su campioni seminali provenienti da 10 stalloni; per ciascun soggetto è stato preparato un pool di tre paillettes da 0,5 ml, successivamente diluito 1:3 con INRA96®. Le valutazioni sono state effettuate 5 (T5) e 60 minuti (T60) post-scongelamento. La concentrazione spermatica è stata determinata sia mediante sistemi CASA sia tramite camera di Thoma, mentre la morfologia è stata valutata con colorazione SpermacStain. Il sistema CASA utilizzato ha influenzato in maniera significativa (P<0,05) tutti i parametri, ad eccezione di DAP, DCL e VCL o STR, considerando tutti gli spermatozoi o solo quelli mobili, rispettivamente. Anche la camera di conteggio ha avuto un effetto significativo (P<0,05): la camera SpermVU® ha fornito valori di motilità più elevati rispetto alla Leja®, indipendentemente dal sistema CASA e dal tempo di incubazione. Questi risultati confermano che la valutazione della qualità seminale mediante sistemi CASA è influenzata da molteplici fattori tecnici e che i dati ottenuti non sono direttamente sovrapponibili tra strumenti differenti senza protocolli standardizzati. L’accurata selezione del sistema CASA e della camera di conteggio, unitamente a una rigorosa standardizzazione dei protocolli, è quindi essenziale per garantire affidabilità, comparabilità e validità clinica delle valutazioni seminali nello stallone.

Semen quality assessment is the cornerstone for estimating stallion fertility potential and is based on the analysis of macroscopic and microscopic parameters, including motility, concentration, and sperm morphology. The use of Computer-Assisted Semen Analysis (CASA) systems has improved the standardization of these evaluations, although results may be influenced by the software, the counting chamber, and the operating conditions. The aim of this study was to compare two CASA systems, AndroVision® (Minitube) and Ceros II® (Hamilton Thorne), in combination with two different counting chambers, Leja® (IMV Technologies) and SpermVU® (Spermtech), for the evaluation of motility, concentration, and kinematic parameters of frozen-thawed stallion semen. The analysis was conducted on semen samples from 10 stallions; for each subject, a pool of three 0.5 ml straws was prepared and subsequently diluted 1:3 with INRA96®. Evaluations were performed at 5 (T5) and 60 minutes (T60) post-thawing. Sperm concentration was determined using both CASA systems and a Thoma chamber, while morphology was assessed via Spermac Stain® coloring. The CASA system employed significantly influenced (P<0.05) all parameters, with the exception of DAP, DCL, and VCL (for total spermatozoa) or STR (for motile spermatozoa only). The counting chamber also showed a significant effect (P<0.05): the SpermVU® chamber provided higher motility values compared to the Leja®, regardless of the CASA system or incubation time. These results confirm that semen quality assessment via CASA systems is influenced by multiple technical factors and that data obtained from different instruments are not directly comparable without standardized protocols. Careful selection of the CASA system and counting chamber, combined with rigorous protocol standardization, is therefore essential to ensure the reliability, comparability, and clinical validity of stallion semen evaluations.