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Tesi etd-10052010-111641


Thesis type
Tesi di laurea specialistica
Author
ARIANI, ANDREA
URN
etd-10052010-111641
Title
Risultati preliminari sulla caratterizzazione funzionale dell'acquaporina AQUA1 del clone CI-214 di pioppo in presenza di zinco
Struttura
SCIENZE MATEMATICHE, FISICHE E NATURALI
Corso di studi
SCIENZE E TECNOLOGIE BIOMOLECOLARI
Commissione
relatore Prof. Andreucci, Andrea
correlatore Sebastiani, Luca
correlatore Dott.ssa Spanò, Carmelina
Parole chiave
  • zinco
  • acquaporine
  • Pioppo
Data inizio appello
25/10/2010;
Consultabilità
parziale
Data di rilascio
25/10/2050
Riassunto analitico
Le aquaporine sono proteine integrali di membrana appartenenti all&#39;antica famiglia delle MIP (Major Intrinsic Protein) e sono presenti in tutte le specie viventi; la loro funzione principale è quella di essere un canale di trasporto per l&#39;acqua, ma recentemente è stato scoperto che possono trasportare altre molecole di interesse fisiologico come urea, glicerolo, formammide, NH3 e CO2 .<br>Nelle piante sono presenti moltissime isoforme che vengono divise in base all&#39;omologia di sequenza in quattro famiglie: PIP (localizzate prevalentemente nella membrana plasmatica), TIP (localizzate prevalentemente nel vacuolo), NIP (con omologia con la proteina Nod-26 localizzata nella membrana peribacteroidea) e SIP (proteine intrinseche di piccole dimensioni).<br>L&#39;abbondanza di acquaporine nelle piante, insieme a prove scientifiche, dimostra la loro importanza per la vita della pianta; infatti è stato dimostrato che queste proteine sono implicate, oltrechè nell&#39;approvigionamento d&#39;acqua, anche nello sviluppo e differenziamento dei tessuti della pianta, nella germinazione e nella rispoduzione, e nella risposta a variazioni e stress ambientali quali cambi di illuminazione, carenza di acqua e nutrienti, salinità, freddo e presenza di metalli pesanti nel suolo. <br>Nel nostro caso è stato visto tramite microarray che la presenza di Zinco determina variazioni quantitative e qualitative del trascrittoma, in particolare determinati geni vengono o sovraespressi o sottoespressi; da questo microarray, e tramite PCR su cDNA di pioppo, sono state isolate diverse sequenze tra cui quella dell&#39;aquaporina down 6.<br>Al fine di permettere studi di localizzazione sub cellulare la sequenza della nostra proteina è stata inserita nel vettore pAVA in frame al gene reporter della GFP.<br>Questi studi sono stati poi effettuati tramite trasfezione transiente per elettroporazione in protoplasti di Arabidopsis e visualizzazione al microscopio confocale di protoplasti cresciuti in condizioni normali, in presenza di Zinco ed in presenza di inibitori dell acquaporine (mercurio).
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