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Archivio digitale delle tesi discusse presso l’Università di Pisa

Tesi etd-11262021-161249


Tipo di tesi
Tesi di laurea magistrale
Autore
VANINETTI, PIETRO
URN
etd-11262021-161249
Titolo
Studio del ruolo di znf367 nella neurogenesi embrionale e adulta
Dipartimento
BIOLOGIA
Corso di studi
BIOLOGIA MOLECOLARE E CELLULARE
Relatori
relatore Prof.ssa Ori, Michela
Parole chiave
  • neurogenesi adulta
  • neurogenesi embrionale
  • neurogenesi
  • zinc finger
  • znf367
  • zebrafish
  • danio rerio
  • linea mutante
  • whole mount
  • ibridazione in situ
  • sviluppo
  • cns
  • sistema nervoso centrale
  • ihc
  • immunoistochimica
  • qpcr
  • quantitative polymerase chain reaction
  • proliferazione
  • differenziamento
Data inizio appello
14/12/2021
Consultabilità
Non consultabile
Data di rilascio
14/12/2061
Riassunto
La neurogenesi è l’evento attraverso il quale si generano neuroni maturi e funzionali a partire da precursori neurali. Inizialmente si pensava che questo processo, nei vertebrati, si verificasse unicamente durante lo sviluppo embrionale e peri-natale. Solo negli ultimi anni si è dimostrato che la neurogenesi avviene anche nei cervelli adulti. Lavori preliminari indicano che la proteina zinc finger znf367 possa avere un ruolo nei processi di proliferazione e differenziamento dei progenitori neurali. Questi studi si sono però basati su tecniche di guadagno o perdita di funzione del gene solamente in maniera transiente a livello embrionale. Per poter studiare il ruolo di znf367 anche nella neurogenesi adulta, si è quindi deciso di creare una linea mutante di zebrafish (Danio rerio) che avesse entrambe le copie di znf367 inattivate mediante la tecnica del CRISPR/Cas9. Lo scopo di questo lavoro è quello di valutare le differenze morfologiche e molecolari tra embrioni di zebrafish mutanti e non, a diversi stadi di sviluppo, in modo tale da poter validare i risultati ottenuti con le iniezioni transienti. In particolare sono state effettuate sia analisi qualitative, attraverso protocolli di ibridazione “in situ” e di immunofluorescenza; sia analisi quantitative tramite esperimenti di PCR quantitativa. Infine, si sono analizzati cervelli di individui adulti wild type e mutanti per znf367, tramite tecniche di marcatura su sezione.
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