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Thesis etd-10202023-125658


Thesis type
Tesi di laurea magistrale LM5
Author
ANTONELLI, GIULIA
URN
etd-10202023-125658
Thesis title
Studio degli effetti antineoplastici in vitro di un nuovo inibitore chinasico, CLM24, nel carcinoma tiroideo aggressivo
Department
FARMACIA
Course of study
FARMACIA
Supervisors
relatore Prof.ssa La Motta, Concettina
correlatore Prof.ssa Ferrari, Silvia Martina
Keywords
  • carcinoma tiroideo de-differenziato
  • composti a nucleo pirazolo[3
  • 4-d]pirimidinico
  • CLM24 de-differentiated thyroid carcinoma
  • pyrazolo[3
  • 4-d]pyrimidine core compounds
  • CLM24
Graduation session start date
08/11/2023
Availability
Withheld
Release date
08/11/2063
Summary
I carcinomi tiroidei (TC) rappresentano oltre il 90% dei tumori endocrini. Il carcinoma tiroideo de-differenziato (DE-DTC) è più aggressivo e resistente alle terapie standard. La conoscenza dei meccanismi molecolari alla base del DE-DTC ha permesso di sviluppare le terapie a target molecolari, tra cui gli inibitori tirosin-chinasici. Sono stati quindi studiati composti a nucleo pirazolo[3,4-d]pirimidinico (CLM3, CLM29, e CLM24) in modelli sperimentali in vitro ed in vivo di TC, con attività inibitorie verso proteine chinasi RET, EGFR, VEGFR e come agenti antiangiogenici.
Lo scopo della mia tesi è quello di valutare se il CLM24 mostri un’attività antineoplastica nel DE-DTC.
CLM24 ha dimostrato un significativo effetto anti-proliferativo e pro-apoptotico sulla linea AF (con mutazione BRAFV600E, ottenuta nel nostro laboratorio da un caso di carcinoma sdifferenziato). Nelle cellule primarie di DE-DTC, l’analisi PCR ha evidenziato la mutazione V600EBRAF in quattro campioni. Nelle cellule DE-DTC con/senza mutazione V600EBRAF, CLM24 ha ridotto significativamente la proliferazione rispetto al controllo, ed è stato osservato un aumento dell’apoptosi e una riduzione di migrazione e invasione. Inoltre, CLM24 ha ridotto significativamente l'espressione di VEGF-A.
In conclusione, il derivato pirazolo[3,4-d]pirimidinico CLM24 ha dimostrato un potente effetto antineoplastico in vitro nelle cellule primarie di DE-DTC, indipendentemente dalla presenza della mutazione BRAF.

De-differentiated thyroid cancer (DE-DTC) (de-differentiated from papillary or follicular thyroid cancer) is aggressive and resistant to standard therapies. The knowledge of the molecular mechanisms underlying DE-DTC has allowed the development of molecular targeted therapies, including tyrosine kinase inhibitors. Compounds with a pyrazolo[3,4-d]pyrimidine nucleus (CLM3, CLM29, and CLM24) were therefore studied in experimental in vitro and in vivo models of TC, with inhibitory activities towards RET, EGFR, VEGFR protein kinases and as antiangiogenic agents.
The aim of my thesis is to evaluate whether CLM24 shows antineoplastic activity in DE-DTC.
CLM24 demonstrated a significant antiproliferative and pro-apoptotic effect on the AF line (with BRAFV600E mutation, obtained in our laboratory from a case of undifferentiated carcinoma). In primary DE-DTC cells, PCR analysis highlighted the V600EBRAF mutation in four samples. In DE-DTC cells with/without V600EBRAF mutation, CLM24 significantly reduced proliferation compared to control, and an increase in apoptosis and a reduction of migration and invasion were observed. Furthermore, CLM24 significantly reduced VEGF-A expression.
In conclusion, the pyrazolo[3,4-d]pyrimidine derivative CLM24 demonstrated a potent antineoplastic effect in vitro in primary DE-DTC cells, regardless of the presence of the BRAF mutation.


File