• HNA-5
• LES
• Lupus Eritematoso Sistemico (LES)
• polimorfismo
• sequenziamento diretto

Il Lupus Eritematoso Sistemico (LES) è una malattia infiammatoria cronica ad eziopatogenesi autoimmune. Nonostante i notevoli progressi sia in ambito diagnostico che terapeutico, la malattia continua ad avere una prognosi severa in alcuni gruppi di pazienti refrattari alle terapie convenzionali.
I diversi sintomi clinici sono dovuti al coinvolgimento di più organi, incluso articolazioni, cuore, vasi sanguigni, polmoni, sistema nervoso e fegato. I meccanismi immunopatologici tradizionalmente coinvolti nello sviluppo della malattia prevedono la complessa compartecipazione di meccanismi umorali (produzione di anticorpi autoreattivi, mediatori della flogosi, immunocomplessi) e cellulari (in particolare mediati da linfociti B e T autoreattivi). Negli ultimi anni sono state fatte nuove scoperte sul sistema immunitario e sui meccanismi di regolazione. In particolare è risultato che gli antigeni con strutture polimorfiche localizzati sulla membrana dei neutrofili umani (HNA), sono coinvolti in numerose condizioni cliniche autoimmuni.
Gli HNA caratterizzati ad oggi sono classificati in 5 sistemi HNA (HNA-1,2,3,4,5). In particolare, durante questo studio abbiamo posto l’attenzione sull’analisi del sistema HNA-5 codificato dal gene ITGAL localizzato sul braccio corto del cromosoma 16. Di questo antigene si conoscono due isoforme, HNA-5a e HNA-5b, che si differenziano per la mutazione in posizione nucleotidica 2372 (G>C) in cui l’Arginina viene sostituita dalla Treonina.
Lo scopo del lavoro di tesi è stato quello di valutare la distribuzione della frequenza allelica e genotipica del polimorfismo 2372 (G>C) del sistema HNA-5. La correlazione con le variabili biochimiche-cliniche dei pazienti potrebbe contribuire a chiarire alcuni aspetti delle manifestazioni e della progressione della malattia.
Per lo studio è stata messa a punto una tecnica ad hoc che prevede il sequenziamento diretto (Sequencing Based Typing) dell’esone 21 in cui è presente il polimorfismo 2372 (G>C).
La genotipizzazione dell’HNA-5 è stata effettuata in maniera automatica mediante l’utilizzo del software SeqScape. In conclusione, il metodo si è dimostrato rapido, sensibile, poco costoso ed estremamente affidabile per la caratterizzazione del polimorfismo.