ETD

Archivio digitale delle tesi discusse presso l'Università di Pisa

Tesi etd-09072022-115328


Tipo di tesi
Tesi di laurea magistrale LM5
Autore
CIMINI, CHIARA
URN
etd-09072022-115328
Titolo
Vescicole Extracellulari derivanti da microglia infiammata e non infiammata: modulazione della capacità migratoria di cellule di microglia e di glioblastoma
Dipartimento
FARMACIA
Corso di studi
CHIMICA E TECNOLOGIA FARMACEUTICHE
Relatori
relatore Prof.ssa Martini, Claudia
relatore Dott. Ceccarelli, Lorenzo
Parole chiave
  • Glioblastoma Multiforme (GBM)
  • microglia
  • Large Extracellular Vesicles (LEVs)
  • Small Extracellular Vesicles (SEVs)
  • Vescicole Extracellulari (EVs)
  • migrazione cellulare
  • estrazione vescicole
  • invasività cellulare
Data inizio appello
05/10/2022
Consultabilità
Non consultabile
Data di rilascio
05/10/2092
Riassunto
Le EVs sono strutture, delimitate da un doppio strato lipidico, prodotte da tutti i tipi di cellule e sono i principali attori della comunicazione cellula-cellula. Sono classificate in base alla loro dimensione e biogenesi in: Small EVs (SEVs), e Large EVs (LEVs).
Oggetto di questo studio è l’effetto delle EVs secrete dalle cellule di microglia umana adulta, linea cellulare C20, sulla migrazione e invasività sia delle cellule di glioblastoma multiforme, linea cellulare U-87MG, sia delle stesse C20. Le EVs sono state isolate, per mezzo di ultracentrifugazioni differenziali, dal surnatante di cellule C20 non trattate e infiammate con due diversi stimoli infiammatori, interleuchina 1β (IL-1β) o lipopolisaccaride (LPS), per 4h o 24h. Sono state, quindi, somministrate a entrambe le linee cellulari, le quali sono state sottoposte a un wound healing assay per valutare l’effetto sulla loro capacità migratoria. In queste condizioni, le C20 mostrano un significativo aumento della migrazione quando trattate con SEVs derivanti da C20 infiammate con LPS per 24h, mentre nelle U-87MG mostrano una riduzione della capacità migratoria se trattate con SEVs derivanti da C20 infiammate con IL-1β per 4h. A conferma dei risultati è stata valutata la variazione della capacità invasiva delle cellule di microglia dopo la somministrazione delle SEVs. I risultati indicano che le EVs pro-infiammatorie possono propagare l’infiammazione alla microglia vicina e contrastare la migrazione del glioblastoma.



EVs are lipid bilayer structures produced by all types of cells and are the key players in cell-cell communication. They are classified according to their size and biogenesis into: Small EVs (SEVs), and Large EVs (LEVs).
The subject of this study is the effect of EVs secreted by adult human microglia cells, C20 cell line, on the migration and invasiveness of both glioblastoma multiforme cells, U-87MG cell line, and C20 themselves. EVs were isolated, by differential ultracentrifugations, from the supernatant of untreated and inflamed C20 cells. The two different inflammatory applied stimuli are interleukin 1β (IL-1β) or lipopolysaccharide (LPS), for 4h or 24h. EVs were administered to both cell lines, which were subjected to a wound healing assay to evaluate the effect on their migratory capacity. Under these conditions, C20s show a significant increase in migration when treated with SEVs deriving from inflamed C20 with LPS for 24h, while in U-87MG they show a reduction in migratory capacity when treated with SEVs deriving from inflamed C20 with IL-1β for 4h. To confirm the results, the variation in the invasive capacity of microglia cells was evaluated after administration of the SEVs. The results indicate that pro-inflammatory EVs can propagate inflammation to nearby microglia and counteract the migration of glioblastoma cells.
File