ETD system

Electronic theses and dissertations repository

 

Tesi etd-09062010-113642


Thesis type
Tesi di laurea specialistica
Author
BASILE, ALICE
URN
etd-09062010-113642
Title
trasformazione transiente di protoplasti di Nicotiana benthamiana per la localizzazione e la visualizzazione di interazioni tra proteine
Struttura
AGRARIA
Corso di studi
BIOTECNOLOGIE VEGETALI E MICROBICHE
Commissione
relatore Perata, Pierdomenico
correlatore Alpi, Amedeo
Parole chiave
  • protoplasti
  • trasformazone transiente
  • BiFC
  • microscopia confocale
Data inizio appello
04/10/2010;
Consultabilità
parziale
Data di rilascio
04/10/2050
Riassunto analitico
E&#39;stato messo a punto un protocollo per l&#39;isolamento e la trasformazione transiente di protoplasti da mesofillo fogliare di Nicotiana benthamiana.<br>I protoplasti sono stati utilizzati come sistema per la visualizzazione della localizzazione a livello subcellulare di proteine di interesse, e l&#39;interazione di coppie di proteine oggetto di studio. <br>Nel caso di studio di localizzazione proteica è stata utilizzata la GFP (green fluorescent protein) come reporter.<br>per lo studio di interazioni tra proteine si ì fatto uso del saggio BiFC. questo appartiene alla classe dei saggi di complementazione proteica; questi si basano sulla possibilità di dividere in due frammenti la proteina caratterizzata da una attività rilevabile. Ad ogni frammento viene fusa una delle due proteine oggetto di studio; nel caso in cui interagiscano i frammenti della proteina si assemblano a formare la proteina integra e viene ricostituita l&#39;attività enzimatica. Nel caso della BiFC si fa uso di frammenti di proteine fluroescenti come la YFP (yellow fluorescent protein. <br>I protoplasti trasformati sono stati visualizzati al microscopio confocale a fluorescenza con l&#39;ausilio di un apposito programma di raccolta immagini.
File