• BiFC
• microscopia confocale
• protoplasti
• trasformazone transiente

E'stato messo a punto un protocollo per l'isolamento e la trasformazione transiente di protoplasti da mesofillo fogliare di Nicotiana benthamiana.
I protoplasti sono stati utilizzati come sistema per la visualizzazione della localizzazione a livello subcellulare di proteine di interesse, e l'interazione di coppie di proteine oggetto di studio.
Nel caso di studio di localizzazione proteica è stata utilizzata la GFP (green fluorescent protein) come reporter.
per lo studio di interazioni tra proteine si ì fatto uso del saggio BiFC. questo appartiene alla classe dei saggi di complementazione proteica; questi si basano sulla possibilità di dividere in due frammenti la proteina caratterizzata da una attività rilevabile. Ad ogni frammento viene fusa una delle due proteine oggetto di studio; nel caso in cui interagiscano i frammenti della proteina si assemblano a formare la proteina integra e viene ricostituita l'attività enzimatica. Nel caso della BiFC si fa uso di frammenti di proteine fluroescenti come la YFP (yellow fluorescent protein.
I protoplasti trasformati sono stati visualizzati al microscopio confocale a fluorescenza con l'ausilio di un apposito programma di raccolta immagini.