• analisi RFLP
• clonaggio
• Funghi AM
• ITS2
• Medicago sativa
• monitoraggio molecolare
• SSU

I funghi micorrizici arbuscolari (AM) sono i simbionti più diffusi nel suolo ed è stato dimostrato che sono fondamentali per la crescita e la nutrizione delle piante. In questo lavoro di tesi è stata monitorata la persistenza in campo di due isolati di Glomus mosseae, IMA1 e AZ225C, introdotti come inoculo in un sito sperimentale di Medicago sativa. Lo schema sperimentale comprendeva piante inoculate con l’isolato IMA1, altre con l’isolato AZ225C e piante controllo. La regione di DNA utilizzata per lo studio è stata quella dell’rDNA nucleare comprendente una porzione di SSU, la regione ITS e parte di LSU. Per valutare la persistenza in campo sono state prelevate tre repliche di campioni di radici di M. sativa dopo il primo mese e dopo due anni dall’insorgenza delle piante inoculate con gli isolati fungini, dalle cui radici è stato estratto il DNA. Gli amplificati, ottenuti attraverso PCR con un primer universale per gli eucarioti (NS31) ed uno specifico per i Glomeromycota (LSUGlom1), sono stati clonati ed almeno 20 cloni per pianta sono stati analizzati tramite RFLP (Restriction Fragment Lenght Polymorphism). I dati di RFLP sono stati sottoposti ad elaborazioni statistiche, comprendenti analisi multivariata e “maximum parsimony analysis”. Tali analisi hanno mostrato che i patterns ottenuti differivano tra le piante inoculate con i diversi funghi e le piante controllo e che l’effetto era dovuto alla presenza degli isolati di G. mosseae IMA1 e AZ225C sia a un mese dall’insorgenza sia dopo due anni dall’inoculo.