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Tesi etd-07192007-122844


Thesis type
Tesi di dottorato di ricerca
Author
Bugliani, Marco
email address
m.bugliani@ao-pisa.toscana.it, marco.bugliani@virgilio.it
URN
etd-07192007-122844
Title
EFFETTI DEGLI INIBITORI DELLA CALCINEURINA SULLE β-CELLULE UMANE
Settore scientifico disciplinare
BIO/14
Corso di studi
CHIRURGIA, BIOTECNOLOGIE E IMMUNOLOGIA DEI TRAPIANTI
Commissione
Relatore Prof. Marchetti, Piero
Parole chiave
  • immunosoppressori
  • ciclosporina
  • β-cellule
  • tacrolimo
Data inizio appello
14/06/2007;
Consultabilità
completa
Riassunto analitico
Un corretto uso dei farmaci immunosoppressori è cruciale per la riuscita di un <br>trapianto di pancreas o isole. Tuttavia, gli agenti immunosoppressori possono <br>avere effetti collaterali deleteri sulla beta cellula pancreatica. Gli studi <br>eseguiti finora, hanno utilizzato per la maggior parte farmaci ormai obsoleti <br>o dosi a concentrazioni farmacologiche più che terapeutiche. Per tale motivo <br>abbiamo osservato gli effetti di una prolungata esposizione di isole <br>pancreatiche umane a 10 ng/ml di Tacrolimo (Tac) o 150 ng/ml di Ciclosporina <br>A (CsA). Per questo studio le isole sono state purificate da pancreas di 14 <br>donatori multi-organo non diabetici (Età: 64±14 anni; Genere: 9M/5F; IMC: <br>25,9±2,9 kg/m2) tramite un protocollo di digestione con collagenasi e <br>purificazione in gradiente di densità. Gli studi morfologici, funzionali e di <br>sopravvivenza sono stati eseguiti dopo 96 ore di incubazione con Tac o CsA. <br>La secrezione insulinica in risposta a glucosio è risultata <br>significativamente ridotta nelle isole esposte a Tac (p&lt;0.05), ma non con a <br>CsA (Indice di stimolazione, ovvero rilascio in risposta a glucosio 16,7 mM <br>rispetto a glucosio 3,3 mM: Isole di controllo Ctrl, 2.3±0.5; Tac 1.6±0.2; <br>CsA, 2.0±0.4). Questi dati non erano associati a variazioni nell’espressione <br>di mRNA di insulina o glut2, ma ad un significativo aumento nell’espressione <br>della glucochinasi nelle cellule esposte a Tac. La microscopia elettronica <br>(ME), inoltre, mostrava una significativa (p&lt;0.05) riduzione nel numero di <br>granuli di insulina mature nelle β-cellule esposte a Tac (densità di volume, <br>ml%: 1,2±0,5), ma non in quelle esposte a CsA (2,6±0,3), quando comparate a <br>Ctrl (3,1±0,6). Infine, mediante ME si è evidenziato che la percentuale di <br>β-cellule apoptotiche era più alta con Tac (15±6) che con Ctrl (4±4) (il <br>rispettivo valore con CsA era 9±5). In conclusione, il Tac ha effetti <br>deleteri più pronunciati sulla funzionalità e sopravvivenza delle <br>beta-cellule umane rispetto alla CsA, quando entrambe vengono usate a <br>concentrazioni terapeutiche.
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