• riprogrammazione fibroblasti
• fotorecettori
• elettrofisiologia
• SAHA

Difetti genetici di alcune proteine localizzate in specifici fotorecettori possono portare alla degenerazione di quest’ultimi e possono essere la causa di alcune patologie, tra cui la retinite pigmentosa, che può portare alla progressiva perdita della vista. Attualmente non esistono farmaci che prevengono o curano la degenerazione retinale. Approcci rigenerativi possono fornire una cura per la cecità andando a garantire un’adeguata fonte di cellule transfettabili. La generazione di precursori di fotorecettori ottenuta tramite riprogrammazione genetica di cellule somatiche ha molti vantaggi rispetto all’utilizzo di cellule staminali embrionali (ES) e cellule staminali pluripotenti indotte (iPS) in termini di sicurezza e di numero di cellule.
In questa tesi abbiamo testato l’effetto della suberoylanilide dell’acido idrossamico (SAHA), un inibitore delle deacetilasi degli istoni (HDAC) di classe I e II, sulle proprietà funzionali di precursori di fotorecettori a bastoncello generati in vitro da fibroblasti embrionali di topo (MEFs).
I nostri risultati indicano che dopo il trattamento di SAHA, le cellule precursori dei bastoncelli esprimono i canali del cGMP, che sono regolati dal cGMP endogeno. Gli effetti del SAHA sono specifici per i precursori dei bastoncelli e richiedono un tempo di induzione di alcuni giorni. Tuttavia il trattamento con SAHA non è riuscito a promuovere l’espressione dell’attività fosfodiesterasica. I nostri dati suggeriscono che lo stato epigenetico dei fibroblasti di topo non permette l’acquisizione delle caratteristiche dei bastoncelli, e le modificazioni posttraduzionali in aggiunta all’acetilazione degli istoni possono ostacolare la trascrizione di geni di specifici fotorecettori nei fibroblasti riprogrammati.