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Archivio digitale delle tesi discusse presso l'Università di Pisa

Tesi etd-06242021-171159


Tipo di tesi
Tesi di laurea magistrale
Autore
CARUSO, TERESITA
URN
etd-06242021-171159
Titolo
"Risposta immune a peptidi derivati da proteine di SARS-Cov-2 in pazienti affetti da CoVID-19 ed in soggetti vaccinati"
Dipartimento
BIOLOGIA
Corso di studi
BIOLOGIA APPLICATA ALLA BIOMEDICINA
Relatori
relatore Migliorini, Paola
Parole chiave
  • neutralizing antibodies.
  • anticorpi neutralizzanti
  • vaccines
  • vaccino
  • SARS-CoV-2
Data inizio appello
13/07/2021
Consultabilità
Non consultabile
Data di rilascio
13/07/2091
Riassunto
Il SARS-CoV-2 è il virus a ssRNA+ appartenente ai Coronavirus, responsabile della pandemia originatasi in Cina nel 2019, estesasi poi in tutto il mondo e tuttora in corso.
Verso la fine del 2020 sono stati resi disponibili vaccini capaci di stimolare una risposta immune verso la proteina Spike di SARS-CoV-2 e il suo Receptor Binding Domain (RBD), la regione che lega il recettore cellulare ACE2.
In questo lavoro di tesi abbiamo valutato l’efficacia di un vaccino a mRNA (Comirnaty) in un gruppo di operatori sanitari dell’AOUP.
In particolare, abbiamo valutato il livello di anticorpi anti-RBD di classe IgG, IgM, IgA mediante test ELISA su RBD ricombinante; il potenziale neutralizzante di tali anticorpi mediante un test di inibizione del legame ACE2-RBD e l’avidità delle IgG e IgA anti RBD prodotte usando un ELISA in presenza di Urea. Infine, abbiamo effettuato un mapping della risposta usando un pannello di peptidi di RBD.
I risultati ottenuti hanno dimostrato che a seguito delle due dosi di vaccino, si osserva: 1) l’aumento del titolo di anti-RBD IgG, IgM ed IgA; 2) la crescita del loro potenziale neutralizzante; 3) l’aumento dell’avidità degli anticorpi anti-RBD. L’epitope mapping suggerisce una maggior reattività verso la regione N-terminale di RBD, rispetto a quella C-terminale.
Questi risultati supportano la scelta di una strategia di vaccinazione basata su due somministrazioni successive ed aprono prospettive di studio per un’analisi fine della risposta immune al vaccino


SARS-CoV-2 is the ssRNA + virus belonging to the Coronavirus, responsible for the pandemic that originated in China in 2019, then spread all over the world and is still ongoing.
In late 2020, vaccines were made available capable of stimulating an immune response to the SARS-CoV-2 Spike protein and its Receptor Binding Domain (RBD), the region that binds the cellular ACE2 receptor.
The aim of this thesis was to evaluated the efficacy of an mRNA vaccine (Comirnaty) in a group of healthcare workers from the AOU Pisana.
In particular, we evaluated the level of IgG, IgM, IgA anti-RBD antibodies by means of an ELISA test on recombinant RBD; their neutralizing potential using an ACE2-RBD binding inhibition test and the avidity of the anti-RBD IgG and IgA produced after vaccination, using an ELISA in the presence of Urea. Finally, we performed an epitope mapping using a panel of peptide covering RBD sequence.
The results obtained showed that following the two doses of the vaccine, we observe: 1) an increase in the titre of anti-RBD IgG, IgM and IgA; 2) an increase of their neutralizing potential; 3) the increase in the avidity of anti-RBD antibodies. The epitope mapping suggested a greater reactivity towards the N-terminal region of RBD, as compared to the C-terminal one.
These results support the choice of a vaccination strategy based on two successive administrations and open study prospects for a fine analysis of the immune response to the vaccine.
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