• Collagene
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• Estrazione
• Enzimi
• Caratterizzazione
• Purificazione
• Monitoraggio
• Peptidi
• Antiossidanti

Lo scopo di questa tesi è quello di studiare e ottimizzare l’estrazione enzimatica di collagene dalla pelle di pesce Basa per realizzare prodotti da impiegare come filler dermici o per applicazioni di tissue engineering. Per realizzare l’estrazione la pelle è stata sottoposta ad un pre-trattamento per l’eliminazione di proteine non collageniche e grassi e successivamente all’estrazione enzimatica con acido acetico e pepsina. Per l’ottimizzazione del processo sono stati studiati la temperatura di estrazione, il rapporto solido/liquido, il tipo di enzima e concentrazione enzimatica, valutando la resa di estrazione come principale risposta. L’estratto ottenuto è stato caratterizzato per il contenuto proteico ed è stata inoltre valutata la sua composizione amminoacidica e la sua purezza mediante cromatografia liquida ad alta prestazione, mentre l’elettroforesi su gel di poliacrilammide con sodio dodecilsolfato ha consentito di identificare il tipo di collagene estratto. La fase di purificazione del prodotto dalle impurezze presenti nell’estratto è stata effettuata mediante “salting-out” e ultrafiltrazione. Sono state inoltre valutate la spettroscopia UV-Vis e quella NIR, inizialmente in modalità “off-line” come possibili strumenti per il monitoraggio del processo, seguite dalla messa a punto di un sistema ''in-situ’’ mediante l’utilizzo di una sonda NIR ad immersione, nell’ottica di sviluppare uno scale-up del processo di estrazione su scala industriale. Infine, è stato studiato e messo appunto il processo per la produzione di peptidi a basso peso molecolare, anche questi di notevole interesse nel campo biologico-farmaceutico per le proprietà antimicrobiche e antiossidanti.