• liver transplant
• trapianto di fegato
• Anelloviridae
• TTMDV
• TTV
• anellovirus

Torque Teno Virus (TTV) e Torque Teno Midi Virus (TTMDV) sono virus appartenenti alla famiglia delle Anelloviridae, caratterizzati dall’assenza di un involucro esterno e da un piccolo genoma circolare di DNA a singolo filamento a polarità negativa. TTV è il prototipo della famiglia ed è classificato nel genere Alphatorquevirus. Rappresenta il più abbondante componente del viroma umano, possiede un’elevata eterogeneità genetica (se ne conoscono almeno 29 specie principali) ed è capace di indurre viremia cronica in circa l’80% della popolazione generale infettando vari distretti dell’ospite. Nonostante i molti studi condotti negli anni, nessuna patologia dell’uomo è stata chiaramente correlata all’infezione da TTV che è quindi, al momento, considerato “orfano” di malattia. TTMDV è classificato nel genere Gammatorquevirus e deve il suo nome alla dimensione del suo genoma (3.2 kb), più piccolo di quello di TTV (3.8 kb).
Un numero crescente di studi evidenzia come la viremia degli anellovirus, ed in particolar modo di TTV, possa rappresentare un utile marcatore dello stato immunologico del paziente. Ciò risulta particolarmente importante in ambito trapiantologico dove la gestione dei farmaci immunosoppressori rappresenta un fattore cruciale per ridurre il rischio di rigetto del trapianto e/o di complicanze infettive. Infatti, una gestione ottimale nel dosaggio di farmaci immunosoppressivi richiede un delicato equilibrio tra il rischio di rigetto del trapianto dovuto ad un’inadeguata immunosoppressione e le complicanze dovute ad un'eccessiva immunosoppressione. Al momento, non esiste un test diagnostico che serva per guidare l’induzione ottimale dell’immunosoppressione, infatti il monitoraggio è principalmente basato sulla quantificazione del livello di farmaci immunosoppressori nel flusso sanguigno, che è maggiormente correlato con il rischio di tossicità del farmaco piuttosto che all'efficacia immunosoppressiva. Vi è dunque un urgente bisogno di marcatori in grado di fornire informazioni sull’effettivo stato di immunosoppressione nei pazienti che ricevono farmaci immunomodulatori al fine di ridurre il rischio dell’insorgenza di malattie infettive e, allo stesso tempo, prevenire complicanze immunologiche quali il rigetto del trapianto. Un buon marcatore è tanto più valido quanto più è predittivo, e quindi valutare l’andamento della viremia degli anellovirus nelle prime settimane post-trapianto può fornire un’informazione precoce delle complicanze infettive e/o immunologiche.
Lo scopo dello studio di tesi è dunque focalizzato alla determinazione dei livelli di viremia di TTV e TTMDV nel periodo immediatamente successivo al trapianto. La misura della viremia sarà condotta con metodi molecolari di Real-Time PCR specifici per la determinazione e la quantificazione dei singoli virus. L’andamento della viremia sarà correlato con le complicanze post-trapianto osservate nei pazienti allo scopo di verificarne le potenzialità come biomarcatore dello status immunologico.

ABSTRACT
Torque Teno Virus (TTV) and Torque Teno Midi Virus (TTMDV) are viruses belonging to the Anelloviridae family, characterized by the absence of an external envelope and by a small circular genome of single-stranded DNA with negative polarity. TTV is the prototype of the family and is classified in the genus Alphatorquevirus. It represents the most abundant component of the human virome, has a high genetic heterogeneity (at least 29 main species are known) and can induce chronic viraemia in about 80% of the general population, infecting various host districts. Despite the many studies conducted over the years, no human pathology has been clearly related to the TTV infection which is, therefore, an orphan virus still in search of a disease. TTMDV is classified in the genus Gammatorquevirus and owes its name to the size of its genome (3.2 kb), smaller than that of TTV (3.8 kb).
An increasing number of studies show that the viraemia of anelloviruses, and in particular of TTV, can represent a useful marker of the patient's immunological status. This is particularly important in the transplant process where the management of immunosuppressive drugs is a crucial factor in reducing the risk of transplant rejection and / or infectious complications. In fact, optimal management of the dosage of immunosuppressive drugs requires a delicate balance between the risk of transplant rejection due to inadequate immunosuppression and complications due to excessive immunosuppression. There is no diagnostic test to guide the optimal induction of immunosuppression at present; the monitoring is mainly based on quantifying the level of immunosuppressive drugs in the bloodstream, which is more correlated with the risk of drug toxicity rather than immunosuppressive efficacy.
For this reason, there is an urgent need for markers capable of providing information on the actual state of immunosuppression in patients receiving immunomodulatory drugs in order to reduce the risk of developing infectious diseases and, at the same time, prevent immunological complications such as rejection of the transplant.
A good marker will be the more valid the more it is predictive; thus, assessing the development of anelloviruses’ viraemia in the first weeks of post-transplant can provide early information on infectious and / or immunological complications.
The purpose of the thesis is thus focused on determining the levels of viraemia of TTV and TTMDV in the period immediately following the transplant. The measurement of viraemia will be carried out with molecular methods of Real-Time PCR specific for the determination and quantification of the single viruses. The course of viraemia will be correlated with post-transplant complications observed in patients in order to verify their potential as a biomarker of immunological status.