• citrato sintasi
• estrazione mitocondri
• solfito ossidasi

Il lavoro di tesi rientra nel progetto dell'iniziativa proteomica mitocondriale che focalizza l'attenzione sulle proteine mitocondriali. Questa iniziativa rientra nello studio ad ampio raggio del progetto proteoma umano incentrato sui cromosomi che ha come scopo quello di caratterizzare le proteine codificate dai 24 cromosomi nucleari entro il 2022. I cromosomi sono stati assegnati a differenti nazioni ed all'Italia é stato attribuito il cromosoma nucleare, il cosiddetto venticinquesimo cromosoma umano. L'iniziativa ha due obiettivi fondamentali:identificare le proteine mitocondriali totali di un tipo cellulare e scoprire nuovi biomarkers mitocondriali che caratterizzano una specifica patologia. Abbiano valutato differenti protocolli di arricchimento mitocondriale su le cellule di fegato di ratto e sulle cellule Hela. Successivamente, per valutare l'efficacia di questi protocolli d'estrazione abbiamo testato l'integrità della membrana mitocondriale interna attraverso la misurazione dell'attività della citrato sintasi, enzima localizzato nella matrice mitocondriale; mentre l'attività della solfito ossidasi, enzima localizzato nello spazio intermembrana é indice dell'integrità della membrana mitocondriale esterna. Abbiamo concluso che i protocolli di arricchimento da noi utilizzati permettono una conservazione delle membrane esterna e interna dei mitocondri integre e una corretta funzionalità mitocondriale. I risultati confluiranno nel progetto dell'iniziativa proteomica mitocondriale che ha lo scopo di cercare i migliori protocolli di estrazione dei mitocondri.