• acquaporina di pioppo

Le acquaporine sono piccole proteine integrali di membrana che appartengono all'antica famiglia delle “major intrinsic protein” (MIP), i cui membri sono presenti in tutti gli organismi viventi. Queste proteine inizialmente destarono un considerevole interesse a causa della loro attività come canali per l'acqua; tuttavia, in tempi più recenti sono stati identificate altre molecole trasportate, con un importante significato fisiologico, dimostrando che le acquaporine sono più che semplici canali per l’acqua. Nonostante le differenze evolutive, la struttura di base di queste proteine è altamente conservata; si tratta, infatti,di tetrameri caratterizzati da un poro acquoso centrale con uno specifico motivo NPA (Asp-Pro-Ala) altamente conservato. Basandosi sull'omologia di sequenza, in molte specie di piante, queste proteine possono essere suddivise in sette sottofamiglie, potenzialmente corrispondenti a distinte localizzazioni subcellulari. Queste sottofamiglie sono: “Plasma membrane Intrinsic Protein” (PIP), “Tonoplast Intrinsic Protein” (TIP), “nodulin-26-like Intrinsic protein” (NIP), “Small basic Intrinsic Protein” (SIP), “Uncategorized X Intrinsic Protein” (XIP), “GlpF-like Intrinsic Protein” (GIP), “Hybrid Intrinsic Protein” (HIP). Lo scopo di questa tesi è la localizzazione sub-cellulare dell’acquaporina AQUA1 di Populus x euroamericana clone I-214, il cui gene è stato identificato come sotto-regolato in esperimenti di microarray su foglie esposte a dosi sub-letali di Zn. I dati della RT-qPCR confermano questo pattern di espressione sia nei tessuti radicali che fogliari. Marker per gli organuli cellulari e la proteina AQUA1 sono stati clonati sotto il controllo del promotore 35S e in frame con una proteina fluorescente (CFP nel caso dei marcatori sub-cellulari, YFP nel caso di AQUA1) per creare dei costrutti con cui co-trasformare i protoplasti di Arabidopsis. I risultati saranno discussi a seguito delle osservazioni al microscopio confocale ed ai dati della letteratura.