Tipo di tesi
Tesi di laurea magistrale LM5
Titolo
Studio del ruolo delle connessine in cellule umane di melanoma cutaneo maligno.
Data inizio appello
20/04/2016
Riassunto (Italiano)
Il melanoma cutaneo maligno è la forma più aggressiva di tumore della pelle. Nuovi farmaci sono stati sviluppati per il suo trattamento, tuttavia, si rende necessaria una migliore conoscenza dei processi di metastatizzazione e di resistenza farmacologica in cui sembrano essere coinvolte le connessine. Questo lavoro di tesi è atto a caratterizzare il ruolo delle connessine Cx26 e Cx43 nelle linee cellulari umane di melanoma cutaneo maligno MeWo, 501Mel e A-375, con differenti origini e genotipo.
Abbiamo valutato l’espressione genica tramite Real-Time PCR, l’espressione proteica mediante analisi Western Blot e la localizzazione cellulare con immunocitochimica.
I dati ottenuti mostrano che i livelli di espressione genica di Cx26 e Cx43 sono bassi nella linea MeWo, intermedi nelle 501Mel ed elevati nelle A-375. L’immunofluorescenza evidenzia una diversa localizzazione di Cx26: nucleare e citoplasmatica nelle MeWo, di membrana nelle 501Mel e citoplasmatica nelle A-375. La Cx43 mostra una positività maggiore nella linea cellulare MeWo (localizzazione prevalentemente citoplasmatica), intermedia nelle 501Mel (localizzazione citoplasmatica) e bassa nelle A-375 (localizzata sulla membrana). L’analisi Western Blot mostra che Cx26 sembra più espressa nelle MeWo rispetto alle A-375.
A seguito del trattamento con vemurafenib, farmaco usato per il trattamento del melanoma BRAF positivo, abbiamo inoltre dimostrato che si ha una riduzione nell’espressione genica di Cx26 e Cx43 in modo correlato allo status mutazionale di BRAF della linea cellulare analizzata. In attesa di ulteriori conferme, i risultati di questo studio possono contribuire ad una migliore comprensione del complesso ruolo delle connessine nel melanoma cutaneo maligno.
