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Tesi etd-06082004-145624


Thesis type
Tesi di laurea vecchio ordinamento
Author
Decembrini, Sarah
email address
sarah.d@tiscali.it
URN
etd-06082004-145624
Title
Ruolo del ciclo cellulare nel differenziamento retinico dei vertebrati
Struttura
SCIENZE MATEMATICHE, FISICHE E NATURALI
Corso di studi
SCIENZE BIOLOGICHE
Commissione
relatore Dott. Cremisi, Federico
relatore Prof.ssa Barsacchi, Giuseppina
Parole chiave
  • gadd45y
Data inizio appello
12/07/2004;
Consultabilità
parziale
Data di rilascio
12/07/2044
Riassunto analitico
La generazione di tipi di neuroni diversi secondo una specifica sequenza temporale è fondamentale per la formazione di strutture neurali stratificate quali corteccia cerebrale e retina. La struttura finale della retina di vertebrato è costituita da sei principali tipi di cellule nervose (gangliari, amacrine, bipolari, orizzontali, bastoncelli e coni) e un tipo di glia (glia di Müller) distribuiti in tre strati cellulari distinti. I diversi tipi cellulari sono generati (cioè i loro progenitori cellulari escono dal ciclo cellulare) in modo temporalmente ordinato: prima le cellule gangliari, seguite da coni, amacrine ed orizzontali, bastoncelli, bipolari ed infine glia di Müller. Tuttavia non è ancora chiaro se la progressione del ciclo cellulare sia veramente necessaria ai cambiamenti di competenza differenziativa dei progenitori cellulari retinici (RPCs). Nella mia tesi ho utilizzato il gene antiproliferativo Xgadd45&amp;#947; come strumento per analizzare gli effetti del blocco del ciclo cellulare sulla retinogenesi. Mediante ibridazione in situ ho evidenziato che Xgadd45&amp;#947; è espresso nei territori in cui i RPCs escono dal ciclo cellulare ed iniziano ad differenziarsi. Ho poi condotto numerosi esperimenti funzionali mediante sovraespressione di Xgadd45&amp;#947; in cloni cellulari isolati di RPCs, iniettando vettori di espressione a DNA in embrione a stadio di 4 cellule, o lipofettando in vivo vescicole ottiche. La sovraespressione di Xgadd45&amp;#947; inibisce il differenziamento di tipi cellulari retinici tardivi come bastoncelli e cellule bipolari. Questo effetto ¨¨ opposto a quello generato dalla progressione forzata del ciclo cellulare mediante lipofezione di cdk2/ciclinaA2. Una domanda che mi sono posta è se la progressione del ciclo cellulare sia necessaria per l&#39;espressione dei geni del differenziamento dei vari tipi cellulari. Il blocco della progressione del ciclo, effettuato sia mediante sovraespressione di Xgadd45&amp;#947; sia con idrossiurea/afidicolina, inibisce l&#39;espressione di geni di specifiche competenze differenziative quali Xbh1 (cellule gangliari), Xotx5 (fotorecettori) Xotx2 e Xchx10 (cellule bipolari), ma non del gene proneurale Xath5 o del marcatore retinico Xrx1. Inoltre RPCs forzati a dividersi mediante lipofezione di cdk2/ciclinaA2 generano poche cellule bipolari (tardive) quando Xotx2 è funzionalmente inattivato. I miei risultati suggeriscono che la progressione del ciclo cellulare dei RPCs sia necessaria per l&#39;espressione di geni chiave che regolano la competenza differenziativa, e di conseguenza per la generazione dei tipi cellulari tardivi della retina matura.<br><br>
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