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Archivio digitale delle tesi discusse presso l’Università di Pisa

Tesi etd-01052007-084610


Tipo di tesi
Tesi di laurea specialistica
Autore
Tripepi, Andrea
Indirizzo email
billgains79@yahoo.it
URN
etd-01052007-084610
Titolo
Trasformazione della lattuga con il gene HPV16 E7GGG-GUS
Dipartimento
AGRARIA
Corso di studi
BIOTECNOLOGIE VEGETALI E MICROBICHE
Relatori
Relatore Dott. Guglielminetti, Lorenzo
Relatore Dott. Pugliesi, Claudio
Relatore Prof. Briza, Jindrich
Relatore Prof. Vlasak, Joseph
Parole chiave
  • Nessuna parola chiave trovata
Data inizio appello
22/01/2007
Consultabilità
Completa
Riassunto
Il papilloma-virus umano tipo 16 (HPV 16) può causare delle infezioni alla cervice uterina che nel corso degli anni possono degenerare in cancri. Le principali proteine coinvolte in questa cancerogenesi sono E6 ed E7 che, essendo polipeptidi costantemente prodotti durante il ciclo virale, rappresentano un ottimo bersaglio per il sistema immunitario, e quindi sono ideali per essere usati come antigeni per vaccini contro questo patogeno. Il nostro intento è stato quindi quello di esprimere il gene E7GGG (una forna avirulenta del gene E7) in lattuga, per produrre l'antigene (la proteina E7GGG appunto) da usare per la preparazione di vaccini da iniettare o da ingerire. Di conseguenza abbiamo trasformato la lattuga con dei costrutti genici, in cui i geni E7GGG (sintetici con codon bias adeguato per l'espressione in patata e cellule umane) sono fusi con il gene GUS (ß-glucoronidasi di E. coli), al fine di misurare l'attività GUS (e quindi l'espressione di questo transgene) e di migliorare l'immunogenicità della proteina suddetta. Nonostante i frequenti problemi di iperidratazione dei tessuti rigeneranti e il parziale inserimento del T-DNA, siamo riusciti ad ottenere delle lattughe transgeniche che esprimevano il gene fuso HPV16 E7GGG-GUS, anche se generalmente l'attività GUS riscontrata non è stata particolarmente elevata.
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